华因康

Klenow Fragment(3’→5’ exo-)

 Klenow Fragment(3'→5' exo-)是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物，具有5'→3'的DNA聚合酶活性，但失去了5'→3'外切核酸酶活性。该酶经突变 (D355A, E357A) 去除了其3'→5'的外切核酸酶活性，所以不适用生成平末端的反应。

特点：

• 缺乏3'→5'外切核酸酶活性。
• 聚合时可掺入修饰的核苷酸（如Cy3-、Cy5-、氨基、生物素、地高辛和荧光素标记的核苷酸）。

应用：

• 随机引物法DNA合成。
• 双链DNA 5'突出(5' overhang)末端的标记。
• 双脱氧法DNA序列测定（Sanger法）。

来源：
从带有编码DNA聚合酶I基因的 E.coli polA菌株中提取，并利用基因重组技术，使用 E.coli表达和纯化Klenow Fragment(3'→5' exo-)。

活性单位定义：
在37°C条件下，30分钟内能使10nmol 的dNTPs掺入酸不溶性物所需要的酶量定义为1个活性单位。

保存条件：
-20℃保存。

抑制和失活：
抑制剂：金属离子螯合剂，无机焦磷酸盐(PPi)，大剂量的无机磷酸盐(Pi)。
失活：  75°C 20分钟。

质量控制：
相关测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶污染。

订购信息：