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Pfu DNA Polymerase

 Pfu DNA Polymerase是一种高保真的耐热性DNA聚合酶，其保真度是Taq DNA聚合酶的8~10倍。该酶不仅具有5′-3′DNA聚合酶活性，还具有3′-5′核酸外切酶校对活性，能及时切除DNA合成链中碱基错配的核苷酸，大大增加了碱基配对的正确率，保证了DNA合成的高度忠实性。该酶不具有5′-3′核酸外切酶活性。

特点：

• 准确性比Taq DNA Polymerase高8倍。
• 热稳定性高。
• 制备平末端PCR产物。

应用：

• 高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、双平端PCR克隆。
• Pfu酶扩增出的DNA片断为双平端，可以用于双平端克隆，不能用于常规的T载体克隆。
• 含有dUTP和dITP的引物不能用于Pfu酶介导的PCR扩增反应。
• 含有来自Pyrococcus furiosus.的Pfu DNA polymeras基因的E.coli。

活性单位定义：
以小牛胸腺DNA为模板，在72℃反应30min，能催化10nmol的dNTP聚合为多核苷酸片段的酶量定义为1个活性单位（U）。

保存条件：
-20℃保存。

抑制和失活：
失活：酚/氯仿抽提。

质量控制：
相关测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶污染，无质粒和支原体污染。

备注：
1、PCR反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异，在具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来设计最佳的反应条件，包括退火温度，延伸时间等。
2、dUTP、dITP和含有这些核苷酸的引物不能用于Pfu DNA Polymerase催化的PCR反应。

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