分子生物学技术服务
质粒大量提取是分子生物学研究中常用的一项技术。质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是进行DNA重组的常用载体。作为一个具有自身复制起点的复制单位独立于细胞的主染色体之外,质粒DNA上携带了部分的基因信息,经过基因表达后使其宿主细胞表现相应的性状。在DNA重组中,质粒或经过改造后的质粒载体可通过连接外源基因构成重组体。 从宿主细胞中提取质粒DNA,是DNA重组技术中最基础的实验技能。提取质粒DNA有三个步骤:培养细菌使质粒扩增,收集和裂解细菌,分离和纯化质粒DNA。
质粒大量提取优势
常规的使用小提试剂盒提取得到的质粒,并不适合用来转染细胞,其原因在于:
小提质粒浓度较低,一般仅为0.1~0.2ug/ul。而用质粒转染细胞,一般至少需要2~5ug左右,如果使用小提质粒,只能加大上样量,这样对转染操作会有一定影响。
小提质粒纯度不够,且内毒素含量较高,会对目的细胞有一定毒性,影响转染效率。
华因康的质粒大量提取服务为您提供至少100ug转染级别的大提质粒,浓度一般为1ug/ul或者是冻干粉状态,大部分内毒素均已去掉,您拿到质粒后就可以直接进行转染实验。
华因康质粒大量提取特点
可一次性提取100ug~500ug的大提质粒,无蛋白质、基因组DNA和RNA污染,已去除了大部分内毒素,纯度高、精度好,使得质粒更适于细胞转染。
本公司目前提供内毒素含量30EU/mg及内毒素含量5EU/mg两种级别的去内毒素服务
客户需提供的信息
- 所提取质粒原样或者菌液(质粒大于100ng,菌液大于100ul)
- 质粒所适宜的宿主菌类以及抗性。稀有抗性需要提供抗生素。